Clinical 🅱iochemistry

“End-point” OR “Rate-reaction ( kinetic )”:
=============================
🔰كيف يتم اختيار طريقة فحص مادة ما؟
End-point” OR kinetic:
سنضرب مثالاً وسنمثّل " اجهزة الـ سي . بي . سي " بالانزيمات وَ " عينات الدم " بالمادة الاساس او السبسترايت substrate

👌إذا افترضنا انك مالك مختبر مرجعي او مركزي كبير الى درجة انه يوجد به غرفة خاصة يتم فيها تحليل صورة للدم او ما نعرفه بـ CBC
ولديك بهذه الغرفة عدد كبير من هذه الاجهزة و الموزعة داخلها، وجاءت الى المختبر حافظة بها عدد من عينات الدم يراد قياس صورة الدم لكل واحدة منها، وطبعاً لديك عدد من فنيي المختبر هم من يشتغل وانت من تقبض ثمن الفحوصات.. فكيف تعرف عدد ما بداخل الحافظة من عينات، اذا كان ثمن فحص كل عينة دولار واحد؟
بكل بساطة ستعطي فنيي المختبر الوقت الكافي – خمس، عشر، عشرين دقيقة ...الخ – حتى يكتمل العمل، و تنظر في النهاية الى كمية المال الذي تم توريده للخزينة . اذا تم توريد عشرة دولارات معناه ان عدد العينات كان عشرة واذا عشرون دولاراً معنى ان عدد العينات كان عشرون ..
وهكذا بالنسبة لفحوصات الـ End-point
اذا اردنا معرفة تركيز مادة ما ولتكن الجلكوز مثلاً:
سنحضر محلولاً به تركيز من الانزيم ونضع فيه السيرم او البلازما، وعند إنتهاء التفاعل سننظر الى تركيز المادة الناتجة والتي بدورها تعكس تركيز المادة الاساس ( الجلكوز )، اذا علمنا ان كل جزيئ من الناتج يمثل جزيئ من الجلكوز..
إذاً سنعرف تركيز الجلكوز بمعرفة تركيز الناتج.

لكن🤔ماذا لو اردنا معرفة تركيز الانزيم وليس المادة الاساس كيف سنعمل؟ هل سنطبّق طريقة End-point؟
دعونا نعود الى المثال السابق ونمثّمل الاجهزة بالانزيمات وعينات الدم داخل الحافظة بالمادة الاساس ونطبق طريقة ال" إيند بوينت" فهل ستفلح ام ان هناك طريقة اخرى غيرها؟

لنفترض ان لدينا عشرون عينة دم داخل الحافظة، واردنا معرفة عدد " اجهزة الـ سي . بي . سي " داخل الغرفة: فإذا اعطينا الوقت الكافي ليتم شغل جميع العينات، فإننا في النهاية سنحصل على عشرون دولاراً والتي تعكس عدد العينات بإفتراض ان ثمن كل عينة دولار واحد ولكنها لا تعكس عدد الاجهزة التي نريد معرفة عددها. فقد يكون عدد الاجهزة: جهاز واحد وبه تم شغل كل العينات، وقد يكون هناك جهازين اشتغل كل منهم عشر عينات او اربعة اجهزة اشتغل كل منهم خمس عينات ....الخ، فهذه الاجهزة تشتغل عدد لا محدود من العينات. فجهاز واحد قادر على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيته عشرين دقيقة ليشتغل وجهازين قادرين على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيتهم عشر دقائق ليشتغلوا..الخ.
ونفس المشكلة نواجهها اذا اردنا معرفة تركيز الانزيم بطريقة الـ End-point.
اذا وضعنا السيرم او البلازما في المحلول وانتطرنا الى ان يتم انتهاء التفاعل، فإن الناتج سيعكس تركيز المادة الاساس وليس الانزيم؛ فمهما كان تركيز الناتج فإنه قد يكون تم انتاجه بفعل وحدة واحدة من الانزيم موجودة بالسيرم او وحدتين او ثلاث او عشر او عشرين...الخ؛ اذا ما اعطيت الوقت حتى اكتمال العمل كون الانزيم يُنتج عدد لا محدود من النواتج، فيعمل على تحويل جزيئة من المادة الاساس الى ناتج وينفك منها وينتقل الى جزيئة ثانية ويعمل على تحويلها وينفك وينتقل الى ثالثة ورابعة وخامسة ويستمر بتحويل جزيئة تلو الاخرى ... عدد لا محدود ... فوحدة واحدة من الانزيم قادرة على تحويل ما تحوله الف وحدة من الانزيمات اذا ما اعطيناه الوقت الذي يحتاجه ليتم تحويل كل المادة الاساس.

فما العمل🤔 في مثل هذه الحالة؟ وكيف نقيس تركيز الانزيم؟ اذا كان الوقت الكافي او نقطة انتهاء العمل لا يمكن من خلالها معرفة تركيز الانزيم او عدد الأجهزة كما في المثال المضروب اعلاه؟؟
👌الحل يكمن في تثبيت وقت محدد للعمل ( دقيقة واحدة مثلاً ) وليس بترك وقت كافٍ لينتهي العمل:
إذا عدنا الى مثالنا السابق والى حيث توقفنا لمعرفة عدد الاجهزة الـ سي بي سي:
اذا كانت هناك عشرون عينة، و عرفنا ان كل جهاز يشتغل عينة واحدة في الدقيقة، سنضبط مؤقت الساعة لدقيقة وبنفس الوقت نبدأ العمل وعند انتهاء الدقيقة ننظر كم عينة تم انجازها، اذا مثلا تم شغل خمس عينات في دقيقة واحدة معناه ان هناك خمسة اجهزة سي بي سي موجودة؛ لأن كل جهاز يشتغل عينة واحدة فقط في الدقيقة، واذا تم انجاز عشر في هذه الدقيقة عينات معناه وجود عشرة اجهزة، واذا اُنجزت خمسة عشر عينة معناه وجود خمسة عشر جهازاً.. وهكذا بالنسبة للانزيم. فالوحدة الواحدة من الانزيم تُحوّل او تُنتج واحد ميكرومول من المادة في الدقيقة ، فإذا تم تحويل او انتاج عشرة ميكرمول من المادة في الدقيقة معناه ان تركيز الانزيم عشر وحدات واذا تم تحويل او انتاج عشرين ميكرومول فتركيز الانزيم يكون عشرين...وهكذا..


لمزيد من المعرفة اكثر عن End-point” & kinetic
نرجو قراءة المنشورين السابقين لهذا المنشور..

https://www.tg-me.com/joinchat-AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

www.tg-me.com/us/Clinical 🅱iochemistry/com.Biochem_Lab/734

12.9K viewsOct 6, 2017 at 15:32

“End-point” OR “Rate-reaction ( kinetic )”:
=============================
🔰كيف يتم اختيار طريقة فحص مادة ما؟
End-point” OR kinetic:
سنضرب مثالاً وسنمثّل " اجهزة الـ سي . بي . سي " بالانزيمات وَ " عينات الدم " بالمادة الاساس او السبسترايت substrate

👌إذا افترضنا انك مالك مختبر مرجعي او مركزي كبير الى درجة انه يوجد به غرفة خاصة يتم فيها تحليل صورة للدم او ما نعرفه بـ CBC
ولديك بهذه الغرفة عدد كبير من هذه الاجهزة و الموزعة داخلها، وجاءت الى المختبر حافظة بها عدد من عينات الدم يراد قياس صورة الدم لكل واحدة منها، وطبعاً لديك عدد من فنيي المختبر هم من يشتغل وانت من تقبض ثمن الفحوصات.. فكيف تعرف عدد ما بداخل الحافظة من عينات، اذا كان ثمن فحص كل عينة دولار واحد؟
بكل بساطة ستعطي فنيي المختبر الوقت الكافي – خمس، عشر، عشرين دقيقة ...الخ – حتى يكتمل العمل، و تنظر في النهاية الى كمية المال الذي تم توريده للخزينة . اذا تم توريد عشرة دولارات معناه ان عدد العينات كان عشرة واذا عشرون دولاراً معنى ان عدد العينات كان عشرون ..
وهكذا بالنسبة لفحوصات الـ End-point
اذا اردنا معرفة تركيز مادة ما ولتكن الجلكوز مثلاً:
سنحضر محلولاً به تركيز من الانزيم ونضع فيه السيرم او البلازما، وعند إنتهاء التفاعل سننظر الى تركيز المادة الناتجة والتي بدورها تعكس تركيز المادة الاساس ( الجلكوز )، اذا علمنا ان كل جزيئ من الناتج يمثل جزيئ من الجلكوز..
إذاً سنعرف تركيز الجلكوز بمعرفة تركيز الناتج.

لكن🤔ماذا لو اردنا معرفة تركيز الانزيم وليس المادة الاساس كيف سنعمل؟ هل سنطبّق طريقة End-point؟
دعونا نعود الى المثال السابق ونمثّمل الاجهزة بالانزيمات وعينات الدم داخل الحافظة بالمادة الاساس ونطبق طريقة ال" إيند بوينت" فهل ستفلح ام ان هناك طريقة اخرى غيرها؟

لنفترض ان لدينا عشرون عينة دم داخل الحافظة، واردنا معرفة عدد " اجهزة الـ سي . بي . سي " داخل الغرفة: فإذا اعطينا الوقت الكافي ليتم شغل جميع العينات، فإننا في النهاية سنحصل على عشرون دولاراً والتي تعكس عدد العينات بإفتراض ان ثمن كل عينة دولار واحد ولكنها لا تعكس عدد الاجهزة التي نريد معرفة عددها. فقد يكون عدد الاجهزة: جهاز واحد وبه تم شغل كل العينات، وقد يكون هناك جهازين اشتغل كل منهم عشر عينات او اربعة اجهزة اشتغل كل منهم خمس عينات ....الخ، فهذه الاجهزة تشتغل عدد لا محدود من العينات. فجهاز واحد قادر على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيته عشرين دقيقة ليشتغل وجهازين قادرين على شغل عشرين عينة اذا ما اعطيتهم عشر دقائق ليشتغلوا..الخ.
ونفس المشكلة نواجهها اذا اردنا معرفة تركيز الانزيم بطريقة الـ End-point.
اذا وضعنا السيرم او البلازما في المحلول وانتطرنا الى ان يتم انتهاء التفاعل، فإن الناتج سيعكس تركيز المادة الاساس وليس الانزيم؛ فمهما كان تركيز الناتج فإنه قد يكون تم انتاجه بفعل وحدة واحدة من الانزيم موجودة بالسيرم او وحدتين او ثلاث او عشر او عشرين...الخ؛ اذا ما اعطيت الوقت حتى اكتمال العمل كون الانزيم يُنتج عدد لا محدود من النواتج، فيعمل على تحويل جزيئة من المادة الاساس الى ناتج وينفك منها وينتقل الى جزيئة ثانية ويعمل على تحويلها وينفك وينتقل الى ثالثة ورابعة وخامسة ويستمر بتحويل جزيئة تلو الاخرى ... عدد لا محدود ... فوحدة واحدة من الانزيم قادرة على تحويل ما تحوله الف وحدة من الانزيمات اذا ما اعطيناه الوقت الذي يحتاجه ليتم تحويل كل المادة الاساس.

فما العمل🤔 في مثل هذه الحالة؟ وكيف نقيس تركيز الانزيم؟ اذا كان الوقت الكافي او نقطة انتهاء العمل لا يمكن من خلالها معرفة تركيز الانزيم او عدد الأجهزة كما في المثال المضروب اعلاه؟؟
👌الحل يكمن في تثبيت وقت محدد للعمل ( دقيقة واحدة مثلاً ) وليس بترك وقت كافٍ لينتهي العمل:
إذا عدنا الى مثالنا السابق والى حيث توقفنا لمعرفة عدد الاجهزة الـ سي بي سي:
اذا كانت هناك عشرون عينة، و عرفنا ان كل جهاز يشتغل عينة واحدة في الدقيقة، سنضبط مؤقت الساعة لدقيقة وبنفس الوقت نبدأ العمل وعند انتهاء الدقيقة ننظر كم عينة تم انجازها، اذا مثلا تم شغل خمس عينات في دقيقة واحدة معناه ان هناك خمسة اجهزة سي بي سي موجودة؛ لأن كل جهاز يشتغل عينة واحدة فقط في الدقيقة، واذا تم انجاز عشر في هذه الدقيقة عينات معناه وجود عشرة اجهزة، واذا اُنجزت خمسة عشر عينة معناه وجود خمسة عشر جهازاً.. وهكذا بالنسبة للانزيم. فالوحدة الواحدة من الانزيم تُحوّل او تُنتج واحد ميكرومول من المادة في الدقيقة ، فإذا تم تحويل او انتاج عشرة ميكرمول من المادة في الدقيقة معناه ان تركيز الانزيم عشر وحدات واذا تم تحويل او انتاج عشرين ميكرومول فتركيز الانزيم يكون عشرين...وهكذا..


لمزيد من المعرفة اكثر عن End-point” & kinetic
نرجو قراءة المنشورين السابقين لهذا المنشور..

https://www.tg-me.com/joinchat-AAAAAECuqoTkgQkHpiHlGA

BY Clinical 🅱iochemistry